溶瘤病毒（oncolytic virus，OVs）是一種新型腫瘤免疫療法，其通過不同的調(diào)控機制在腫瘤細胞內(nèi)復制、裂解腫瘤細胞，而不影響正常細胞生長。目前，溶瘤病毒主要有腺病毒（adenovirus，AD）、痘病毒、皰疹病毒、呼腸孤病毒和柯薩奇病毒等，給藥方法有瘤內(nèi)注射，靜脈輸送，胸腹腔、膀胱內(nèi)注射和細胞載體四種。

       溶瘤病毒抗腫瘤機制

       溶瘤病毒選擇性感染腫瘤細胞，在腫瘤細胞內(nèi)進行自我復制來破壞腫瘤細胞，通過釋放病原體相關(guān)分子(pathogen-associated molecular pattern molecules，PAMP)、腫瘤相關(guān)抗原(tumor-associated antigen，TAA) 、炎性因子、趨化因子等物質(zhì)，激活機體免疫系統(tǒng)，直接或間接殺傷腫瘤細胞，將冷腫瘤轉(zhuǎn)變?yōu)闊崮[瘤。①直接感染裂解腫瘤細胞而不感染正常細胞。病毒在進入腫瘤細胞后，大量復制造成腫瘤細胞的裂解，直接殺傷腫瘤細胞，同時在腫瘤組織內(nèi)產(chǎn)生空間，增加免疫細胞的浸潤和增殖。②釋放腫瘤抗原，刺激機體免疫應答。腫瘤細胞裂解后釋放危險相關(guān)分子( danger-associated molecular pattern molecules，DAMPs)、PAMP和TAA 募集抗原提呈細胞( antigen presenting cell，APC)，APC 將TAA呈遞給殺傷性T細胞，產(chǎn)生免疫應答。同時激活 NF-κB 信號通路，誘導腫瘤壞死因子-α ( tumor necrosis factor-α，TNF-α) 和白細胞介素-6 ( interleukin-6，IL-6) 因子表達，產(chǎn)生炎性微環(huán)境，促進免疫細胞成熟和激活，增強抗腫瘤作用。③調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境，逆轉(zhuǎn)免疫抑制微環(huán)境。溶瘤病毒感染腫瘤細胞，可活化樹突狀細胞 (dendritic cells，DC) 細胞表面的模式識別受體(pattern recognition receptor，PRR)，逆轉(zhuǎn)免疫抑制狀態(tài)的DC 細胞，促進DC 細胞對腫瘤細胞的識別，上調(diào) CXCL1 和CXCL5 等趨化因子的表達，誘導中性粒細胞浸潤，逆轉(zhuǎn)腫瘤部位免疫抑制微環(huán)境，增強抗腫瘤效應。④轉(zhuǎn)基因改造促使免疫調(diào)節(jié)因子表達并增加腫瘤部位免疫細胞的浸潤和增殖。基因改造后的溶瘤病毒在進入腫瘤細胞后，進一步表達炎性因子或?qū)γ庖呒毎苯幼饔?，激活機體免疫系統(tǒng)，殺傷殘留的腫瘤細胞。⑤轉(zhuǎn)基因改造促使趨化因子表達并增加免疫細胞歸巢和浸潤。基因改造后的溶瘤病毒在進入腫瘤細胞后，進一步表達趨化因子等，使腫瘤部位免疫細胞歸巢，增強抗腫瘤作用。⑥破壞腫瘤相關(guān)血管。腫瘤的生長依賴腫瘤血管提供營養(yǎng)物質(zhì)，因此，破壞腫瘤相關(guān)血管能夠有效地抑制腫瘤的生長。研究表明，水泡性口炎病毒(VSV) 可以在體內(nèi)直接感染并破壞腫瘤血管，而對正常血管沒有影響。水泡性口炎病毒在腫瘤組織中擴散并進行復制，啟動機體內(nèi)由嗜中性粒細胞介導的炎癥反應，從而導致腫瘤血管內(nèi)微血栓的形成。腫瘤血管內(nèi)的微血栓影響血管向腫瘤組織提供營養(yǎng)物質(zhì)，最終導致腫瘤細胞缺少營養(yǎng)死亡。

       溶瘤病毒聯(lián)合治療現(xiàn)狀

       溶瘤病毒是一種多功能抗癌藥，選擇性感染、復制并殺死腫瘤細胞。溶瘤病毒在多個臨床試驗中顯示出不同的治療效果，但很少長期誘導體內(nèi)腫瘤的完全消退。而且，異質(zhì)性腫瘤的選擇性壓力導致對溶瘤病毒的抗性。為了克服這些不足，臨床上建立起許多新穎溶瘤病毒聯(lián)合療法，增強對腫瘤的殺傷力。

       1、溶瘤病毒聯(lián)合化療或靶向治療

       化療是直接殺死惡性細胞，增強腫瘤細胞免疫原性，增強溶瘤病毒的細胞毒 性，溶瘤病毒聯(lián)合化療具有協(xié)同作用，促進抗腫瘤免疫反應。溶瘤病毒聯(lián)合化療的機制包括：①逃避抗病毒免疫反應，增強病毒溶瘤作用，改善 HSV、AD、麻疹病毒和呼腸孤病毒抗腫瘤功效；②抵抗免疫，抑制腫瘤微環(huán)境。腫瘤微環(huán)境主要組成部分是調(diào)節(jié)性T 細胞（regulatory cells，Treg）和骨髓來源抑制性細胞（my eloid-derived suppressor cells，MDSC），二者能有效降低腫瘤免疫性。研究表明，腫瘤微環(huán)境內(nèi)的MDSC積累會抑制抗腫瘤效應 T 細胞，促進腫瘤生長，吉西他濱、舒尼替尼、5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-Fu）等許多化學藥物能清除MDSC，提高生存率。③調(diào)節(jié)腫瘤細胞免疫原性。阿霉素和 Ara-C能降低免疫檢查點分子的表達，阻斷其對浸潤 T 細胞的抑制?；熕幬镉绊懚鄠€生物過程，如雷帕霉素及其類似物改變 mTOR 信號傳導，增加溶瘤病毒靶向性，誘導自噬。溶瘤病毒聯(lián)合化療或單藥治療腫瘤均優(yōu)于化療。

       與聯(lián)合化療原理相同，靶向治療能抑制癌細胞內(nèi)異常的信號通路。聯(lián)合使用BRAF、MRK 激酶抑制劑和 3 型呼腸孤病毒 [reovirus type 3（Dearing），RT3D]，通過細胞凋亡體外殺死細胞。RT3D 聯(lián)合細胞毒 性藥物研究表明，RT3D 安全、可耐受，將RT3D 與常規(guī)抗癌藥物聯(lián)合使用，可實現(xiàn)協(xié)同作用。

       2、溶瘤病毒聯(lián)合放療

       溶瘤病毒和放療是腫瘤治療的兩個不同領(lǐng)域，為不重疊的細胞毒 性譜。輻射能增強病毒的溶瘤作用，病毒能夠提高細胞放療敏感性，二者具有協(xié)同作用。溶瘤病毒是一種極具潛力的腫瘤治療策略。最初認為溶瘤病毒的細胞毒 性是增加病毒復制、增強腫瘤細胞感染和溶瘤作用，但目前大多認為溶瘤病毒阻止DNA 修復，使腫瘤細胞對輻射敏感，誘導細胞凋亡。溶瘤病毒與放療聯(lián)合抗腫瘤，療效顯著。高度減毒的牛痘病毒（VV，GL-ONC1）結(jié)合放療，可提高抗腫瘤療效；高劑量放療增強腺病毒在前列腺癌細胞內(nèi)的復制，抑制癌細胞的增殖。與單獨治療相比，HSV-1 聯(lián)合放療對疾病預后有明顯改善作用，NVl066 聯(lián)合放療能顯著縮小非小細胞肺癌和惡性間皮瘤的腫瘤體積。

       3、溶瘤病毒聯(lián)合免疫治療

       溶瘤病毒雖然能夠快速減少局部腫塊大小，但不易產(chǎn)生持續(xù)性抗腫瘤免疫應答。免疫應答是溶瘤病毒療法的關(guān)鍵組成部分，初始誘導很強，隨后效應細胞的抗腫瘤活性被多種免疫調(diào)節(jié)劑（如 CTLA-4 和 PD-L1）抑制。在惡性黑色素瘤小鼠模型中，溶瘤麻疹病毒能夠?qū)⒖笴TLA-4 和抗 PD-L1 抗體靶向遞送至腫瘤微環(huán)境，誘導較強的特異性抗腫瘤免疫反應，未發(fā)現(xiàn)免疫相關(guān)毒 性。另一種黑色素瘤小鼠模型中，瘤內(nèi)注射 NDV 聯(lián)合抗CTLA-4 抗體能使腫瘤消退，存活時間延長。PDL1 產(chǎn)生于腫瘤細胞和浸潤腫瘤細胞的過表達，與 T細胞上的 PD-1 結(jié)合，誘導 T 細胞凋亡，使腫瘤細胞逃逸。溶瘤病毒感染會增強免疫調(diào)節(jié)劑的表達，增強腫瘤細胞對 PD-1 或 PDL1 阻斷的敏感性，引起抗腫瘤免疫反應。因此，溶瘤病毒聯(lián)合免疫具有治療價值。聯(lián)合療法增加腫瘤內(nèi) CD8+ T 細胞浸潤，可能吸引腫瘤特異性 T 細胞，逆轉(zhuǎn)對 PD-1 阻斷療法的耐藥性。溶瘤病毒瘤內(nèi)給藥后CD4+和 CD8+ T 細胞全身性增加，CD8+ T 細胞表達PD-1、增加對腫瘤的浸潤，而腫瘤細胞表達 PD-L1，可能限制了溶瘤病毒單藥的抗腫瘤活性，臨床活性優(yōu)于單獨使用任何一種療法的預期。

       第一代溶瘤病毒僅具有腫瘤特異性，如H101、Reolysin 和 Telomelysin；第二代溶瘤病毒具有腫瘤特異性，含有1個功能性外源基因的表達，如T-VEC、JX-594和H102；第三代溶瘤病毒具有腫瘤特異性、免疫調(diào)節(jié)與免疫治療功能，多于 1 個功能性外源基因的表達，外源基因功能相互協(xié)調(diào)，如 GO701 和 GV802。近年來，隨著醫(yī)療水平的提升及技術(shù)的成熟，溶瘤病毒越來越頻繁地應用于抗腫瘤治療，為廣大惡性腫瘤患者帶來希望?？鼓[瘤療法中，目前最常用的兩種溶瘤病毒是重組人 5 型腺病毒（安柯瑞，H101）與 T-VEC（talimogene laherparepvec）。H101 是一種經(jīng)基因改造的溶瘤腺病毒，于2005年被國家食品藥品監(jiān)督管理總局（CFDA）批準用于聯(lián)合化療治療鼻咽癌，是世界上最早的一款溶瘤病毒。T-VEC 是第二代單純皰疹病毒Ⅰ型，于2015 年被美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準用于治療不能手術(shù)的黑色素瘤，隨后于2016 年在歐洲獲得批準。

       參考資料

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       [2]李平翠,楊帆,歐霞,張繼虹,魏大巧。溶瘤病毒載體研究進展[J]。生物化學與生物物理進展,2021,48(03):237-245。DOI:10。16476/j。pibb。2020。0146。

       [3]王磊,霍彬,霍小東,王海濤。溶瘤病毒抗腫瘤治療的臨床應用進展[J]。中國腫瘤臨床,2021,48(11):581-586。

       作者簡介：小泥沙，食品科技工作者，食品科學碩士，現(xiàn)就職于國內(nèi)某大型藥物研發(fā)公司，從事營養(yǎng)食品的開發(fā)與研究。