摘要：近年來(lái)，免疫療法在乳腺癌（BC）治療中顯示出鼓舞人心的結(jié)果。程序性細(xì)胞死亡配體1（PD-L1）跨膜蛋白被認(rèn)為是免疫反應(yīng)中的共抑制因子，它與程序性細(xì)胞死亡蛋白1（PD-1）合作，刺激凋亡，抑制PD-1陽(yáng)性細(xì)胞釋放細(xì)胞因子，并限制PD-1陽(yáng)性細(xì)胞的生長(zhǎng)。此外，在許多惡性腫瘤中，PD-L1降低了免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤細(xì)胞的反應(yīng)。這些觀察結(jié)果表明，PD-1/PD-L1軸在癌癥治療和調(diào)節(jié)癌癥免疫逃逸機(jī)制中發(fā)揮著重要作用。本綜述旨在概述PD-1和PD-L1在BC癌癥治療中的功能。

       方法：本研究設(shè)計(jì)為文獻(xiàn)綜述。風(fēng)格是關(guān)于PD-1/PD-L1通路相關(guān)主題或變量的傳統(tǒng)綜述。使用三個(gè)在線數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行了文獻(xiàn)搜索。

       結(jié)果：使用關(guān)鍵詞進(jìn)行搜索，共得到248項(xiàng)研究。根據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)再次篩選每個(gè)結(jié)果，最終共有4項(xiàng)研究納入文獻(xiàn)綜述。

       結(jié)論：PD-1/PD-L1的結(jié)合對(duì)許多惡性腫瘤至關(guān)重要。根據(jù)所提供的證據(jù)，這種結(jié)合在癌癥治療中既提供了機(jī)會(huì)也帶來(lái)了挑戰(zhàn)。由于許多實(shí)體癌癥，特別是乳腺癌，表達(dá)高水平的PD-1/PD-L1，癌癥治療主要涉及靶向療法。

       1.引言

       乳腺癌（BC）的治療取決于個(gè)體情況。腫瘤學(xué)研究（基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、代謝組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)）、設(shè)備開(kāi)發(fā)（診斷和治療）以及藥物發(fā)現(xiàn)在BC治療中扮演著重要角色。手術(shù)仍然是主要的治療方式，并且已經(jīng)發(fā)展出許多創(chuàng)新的乳房切除技術(shù)。癌癥研究傳統(tǒng)上關(guān)注癌細(xì)胞和癌癥作為一種基因疾??；然而，對(duì)這種疾病作為系統(tǒng)性疾病的廣泛調(diào)查已經(jīng)確定癌癥是一種具有多種表現(xiàn)的復(fù)雜疾病。因此，研究已經(jīng)從關(guān)注癌細(xì)胞發(fā)展到基于宿主體內(nèi)的免疫系統(tǒng)功能及其起源環(huán)境的全面方法。與免疫系統(tǒng)相關(guān)的癌癥兩個(gè)特征是慢性炎癥，它鼓勵(lì)腫瘤發(fā)展，以及癌細(xì)胞逃避免疫系統(tǒng)破壞的能力。免疫系統(tǒng)可能無(wú)法抑制癌細(xì)胞的增殖并誘導(dǎo)這些細(xì)胞的進(jìn)一步發(fā)展，這被稱(chēng)為免疫編輯假說(shuō)。逃避免疫系統(tǒng)的能力是Hanahan和Weinberg概述的癌細(xì)胞十個(gè)屬性中的一個(gè)重要組成部分（圖1）。近年來(lái)，免疫療法在乳腺癌（BC）治療中顯示出鼓舞人心的結(jié)果。程序性細(xì)胞死亡蛋白1（PD-1）通過(guò)防止調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的凋亡、觸發(fā)抗原特異性T細(xì)胞的凋亡和控制T細(xì)胞活性來(lái)促進(jìn)自我耐受并抑制免疫反應(yīng)。程序性細(xì)胞死亡配體1（PD-L1）跨膜蛋白被認(rèn)為是免疫反應(yīng)中的共抑制因子，它與PD-1合作，刺激凋亡，抑制PD-1陽(yáng)性細(xì)胞釋放細(xì)胞因子，并限制PD-1陽(yáng)性細(xì)胞的生長(zhǎng)。此外，在許多惡性腫瘤中，PD-L1降低了免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤細(xì)胞的反應(yīng)。這些觀察結(jié)果表明，PD-1/PD-L1軸在癌癥治療和調(diào)節(jié)癌癥免疫逃逸機(jī)制中發(fā)揮著重要作用。本綜述旨在概述PD-1和PD-L1在BC中的功能，以增強(qiáng)癌癥治療。

圖1. 癌細(xì)胞的特征。使用Biorender.com創(chuàng)建。

       2.方法

       本研究設(shè)計(jì)為文獻(xiàn)綜述。風(fēng)格是關(guān)于PD-1/PD-L1通路相關(guān)主題或變量的傳統(tǒng)綜述。使用三個(gè)在線數(shù)據(jù)庫(kù)（PubMed、Crossref和Google Scholar）進(jìn)行了文獻(xiàn)搜索。搜索詞包括主要關(guān)鍵詞“程序性細(xì)胞死亡1受體”和“程序性細(xì)胞死亡1配體1”，以及幾個(gè)輔助關(guān)鍵詞“乳腺癌”和“免疫系統(tǒng)”。包括的文章是那些有全文可用且用英語(yǔ)發(fā)表的文章。

       3.結(jié)果

       使用主要關(guān)鍵詞“程序性細(xì)胞死亡1受體”和“程序性細(xì)胞死亡1配體1”，以及之前描述的幾個(gè)輔助關(guān)鍵詞進(jìn)行搜索，共得到248項(xiàng)研究。根據(jù)文章的標(biāo)題和摘要篩選每個(gè)結(jié)果，并根據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)再次篩選，最終共有4項(xiàng)研究納入文獻(xiàn)綜述（圖2）。

圖2. 本研究中使用了PRISMA流程圖。

       4.討論

       4.1.癌癥免疫系統(tǒng)

       為了有效地消除癌細(xì)胞，免疫反應(yīng)必須包括一系列連續(xù)和重復(fù)的過(guò)程，建立癌癥免疫的循環(huán)（圖3）。癌細(xì)胞最初產(chǎn)生新抗原，隨后釋放并被抗原呈遞細(xì)胞（APCs）捕獲。為了引發(fā)抗腫瘤反應(yīng)并減輕對(duì)產(chǎn)生的腫瘤抗原的外周抵抗，這一階段需要一個(gè)獨(dú)特的信號(hào)。這些免疫原性信號(hào)包括由凋亡腫瘤細(xì)胞釋放的炎癥細(xì)胞因子和化學(xué)物質(zhì)。當(dāng)APCs附著在主要組織相容性復(fù)合體（MHC）分子上時(shí)，處理過(guò)的抗原被呈遞給T細(xì)胞。然后效應(yīng)T細(xì)胞識(shí)別癌癥特異性抗原作為潛在的有害入侵者，此時(shí)效應(yīng)和調(diào)節(jié)性（T reg）T細(xì)胞之間的比例決定了激活的免疫反應(yīng)類(lèi)型。一旦激活，效應(yīng)T細(xì)胞就前往腫瘤部位并與腫瘤細(xì)胞上的抗原相互作用，之后它們綁定到這些細(xì)胞并殺死它們。隨著腫瘤細(xì)胞被破壞，反應(yīng)循環(huán)隨著更多腫瘤特異性抗原的增加而加強(qiáng)。這個(gè)過(guò)程并不理想，這個(gè)系統(tǒng)可能會(huì)出現(xiàn)幾個(gè)問(wèn)題。例如，腫瘤抗原可能未被檢測(cè)到；APCs和T細(xì)胞可能將腫瘤抗原誤認(rèn)為是自身抗原，導(dǎo)致T reg反應(yīng)而不是抗腫瘤反應(yīng)；腫瘤微環(huán)境可能會(huì)抑制產(chǎn)生的效應(yīng)細(xì)胞。癌癥免疫循環(huán)需要多個(gè)組件的協(xié)調(diào)作用，包括激活免疫系統(tǒng)對(duì)抗癌細(xì)胞的免疫刺激因子和調(diào)節(jié)這種活動(dòng)的抑制因子。這些因素在循環(huán)的每一步中協(xié)作。刺激因子促進(jìn)免疫，而抑制因子監(jiān)控正在進(jìn)行的過(guò)程，減少免疫反應(yīng)活動(dòng)和/或防止自身免疫。像PD-L1這樣的檢查點(diǎn)蛋白，被稱(chēng)為免疫調(diào)節(jié)劑，表現(xiàn)出抑制功能以調(diào)節(jié)腫瘤組織中活躍的免疫反應(yīng)。例如，當(dāng)T細(xì)胞表面的PD-1受體與癌細(xì)胞表達(dá)的PD-L1結(jié)合時(shí)，T細(xì)胞功能受到抑制。PD-L1的過(guò)表達(dá)在各種類(lèi)型的癌癥中很常見(jiàn)，并因其對(duì)抗癌反應(yīng)的抑制作用而與預(yù)后不良相關(guān)。

圖3. 癌癥免疫系統(tǒng)。使用Biorender.com創(chuàng)建。

       4.2.免疫編輯

       免疫編輯過(guò)程闡明了免疫系統(tǒng)在乳腺癌的發(fā)展和演變中的作用。免疫系統(tǒng)有助于預(yù)防癌癥以及疾病的發(fā)生、侵襲和轉(zhuǎn)移。目前，許多癌癥治療方法專(zhuān)注于如何更有效地利用免疫系統(tǒng)，例如使用適應(yīng)性免疫療法和單克隆抗體來(lái)阻止T細(xì)胞接收到的抑制信號(hào)，如抗PD-1。免疫編輯的三個(gè)主要階段是消除、平衡和逃逸（圖4）。消除階段涉及適應(yīng)性免疫系統(tǒng)識(shí)別和根除癌細(xì)胞。細(xì)胞毒性免疫細(xì)胞釋放穿孔素以觸發(fā)癌細(xì)胞溶解。通過(guò)消除階段的癌細(xì)胞過(guò)渡到平衡階段，它們利用免疫系統(tǒng)的負(fù)向調(diào)節(jié)動(dòng)態(tài)。在這個(gè)階段，免疫反應(yīng)有效地調(diào)節(jié)癌細(xì)胞的增殖、擴(kuò)散和程序性細(xì)胞死亡（凋亡）。然而，癌細(xì)胞之間的異質(zhì)性和遺傳變異使它們能夠從這種平衡中逃逸，此時(shí)激活免疫抑制機(jī)制。

圖4. 免疫編輯過(guò)程的階段。使用Biorender.com創(chuàng)建。

       4.3.免疫反應(yīng)對(duì)腫瘤發(fā)展的影響

       循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移涉及癌細(xì)胞的釋放、逃避免疫系統(tǒng)以及通過(guò)粘附和滲出血管產(chǎn)生遠(yuǎn)距離轉(zhuǎn)移。免疫系統(tǒng)與CTCs的相互作用對(duì)這些過(guò)程至關(guān)重要。原發(fā)腫瘤平均每天向血液中釋放數(shù)千個(gè)腫瘤細(xì)胞；然而，很少測(cè)量CTCs的數(shù)量。這是因?yàn)閺脑济庖咭种莆h(huán)境中釋放出來(lái)的腫瘤細(xì)胞變得容易受到免疫細(xì)胞的攻擊。圖5展示了CTCs免疫逃逸的圖示。

圖5. 基于免疫系統(tǒng)的轉(zhuǎn)移級(jí)聯(lián)的主要階段。使用Biorender.com創(chuàng)建。

       免疫反應(yīng)高度依賴于免疫系統(tǒng)識(shí)別觸發(fā)免疫反應(yīng)的抗原的能力。免疫反應(yīng)細(xì)胞源自多能干細(xì)胞，它們通過(guò)淋巴途徑分化，產(chǎn)生淋巴細(xì)胞及其亞群，或通過(guò)髓系途徑形成吞噬細(xì)胞和其他細(xì)胞。主要的免疫活性細(xì)胞是T淋巴細(xì)胞，而次要成分包括T輔助細(xì)胞、T細(xì)胞毒性細(xì)胞和T調(diào)節(jié)細(xì)胞，每種細(xì)胞都發(fā)揮不同的功能。

       免疫編輯是腫瘤進(jìn)展的重要組成部分。在平衡階段，通過(guò)產(chǎn)生抑制信號(hào)等方法，消除轉(zhuǎn)化細(xì)胞可以誘導(dǎo)產(chǎn)生免疫原性低且對(duì)效應(yīng)T細(xì)胞更具抵抗力的腫瘤變體。此外，腫瘤衍生的可溶性因子（TDSF）可以誘導(dǎo)多種機(jī)制，允許在腫瘤微環(huán)境中逃避免疫細(xì)胞攻擊。

       免疫細(xì)胞未能消除原發(fā)腫瘤細(xì)胞導(dǎo)致這些細(xì)胞增殖并進(jìn)行有絲分裂。細(xì)胞增殖通常與快速腫瘤生長(zhǎng)和更具侵略性的生物學(xué)和臨床行為相關(guān)，這種活動(dòng)可以通過(guò)計(jì)算有絲分裂指數(shù)來(lái)識(shí)別。有絲分裂指數(shù)是確定包括BC在內(nèi)的多種腫瘤的侵略性和分化程度的金標(biāo)準(zhǔn)。

       由于免疫反應(yīng)失敗，腫瘤進(jìn)展增加在觀察到腫瘤增大時(shí)變得明顯。腫瘤細(xì)胞的增殖和有絲分裂數(shù)量顯著增加，導(dǎo)致體積加速增長(zhǎng)，這可以通過(guò)臨床檢查和成像評(píng)估。實(shí)體癌癥治療涉及移除原發(fā)腫瘤和消除轉(zhuǎn)移；因此，在臨床實(shí)踐中理解和控制轉(zhuǎn)移很重要。轉(zhuǎn)移從單個(gè)實(shí)體腫瘤開(kāi)始，經(jīng)歷多個(gè)轉(zhuǎn)移階段，導(dǎo)致已經(jīng)擴(kuò)散且難以治愈的癌癥。

       在每個(gè)階段，宿主免疫系統(tǒng)可以識(shí)別癌細(xì)胞。在原發(fā)腫瘤階段，一些免疫細(xì)胞作為促轉(zhuǎn)移劑，如T調(diào)節(jié)細(xì)胞，通過(guò)分泌IL 10提供免疫抑制，從而抑制細(xì)胞毒性T細(xì)胞和NK細(xì)胞的反應(yīng)。其他免疫細(xì)胞，包括巨噬細(xì)胞，參與血管生成過(guò)程，其中M2腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）產(chǎn)生CCL-2和IL-10以促進(jìn)血管生成；通過(guò)表達(dá)精氨酸酶阻斷DCs、T細(xì)胞和NK細(xì)胞來(lái)增強(qiáng)免疫抑制；并使用基質(zhì)金屬蛋白酶通過(guò)改變基質(zhì)促進(jìn)侵襲。一些免疫細(xì)胞作為抗轉(zhuǎn)移劑，如細(xì)胞毒性NK細(xì)胞、T細(xì)胞和M1 TAMs，它們殺死癌細(xì)胞。

       在M2循環(huán)階段，TAMs和T調(diào)節(jié)細(xì)胞作為促轉(zhuǎn)移劑，其中T調(diào)節(jié)細(xì)胞減少并抑制循環(huán)中的NK細(xì)胞和T細(xì)胞，這允許轉(zhuǎn)移細(xì)胞存活。雖然細(xì)胞毒性T細(xì)胞和NK細(xì)胞識(shí)別并殺死癌細(xì)胞，M1 TAM細(xì)胞產(chǎn)生CXCL9、IL-6和IL-12來(lái)表達(dá)iNOS并通過(guò)產(chǎn)生一氧化氮直接破壞腫瘤細(xì)胞。在轉(zhuǎn)移生態(tài)位階段，成熟的NK細(xì)胞促進(jìn)轉(zhuǎn)移生態(tài)位生長(zhǎng)，當(dāng)這些細(xì)胞具有低免疫能力時(shí)。

       相反，未成熟的NK細(xì)胞抑制轉(zhuǎn)移生態(tài)位形成。在這個(gè)階段，巨噬細(xì)胞（M2）通過(guò)誘導(dǎo)局部免疫抑制環(huán)境參與準(zhǔn)備轉(zhuǎn)移生態(tài)位，而M1刺激局部免疫。此外，當(dāng)細(xì)胞毒性T細(xì)胞進(jìn)入轉(zhuǎn)移生態(tài)位時(shí)，它們可以識(shí)別并殺死癌細(xì)胞。

       5.PD-L1

       5.1.PD-L1結(jié)構(gòu)

       當(dāng)T淋巴細(xì)胞通過(guò)識(shí)別主要組織相容性復(fù)合體（MHC）在特定細(xì)胞上的抗原時(shí)，炎癥細(xì)胞因子被分泌到循環(huán)系統(tǒng)中。通過(guò)特定細(xì)胞因子的作用，T細(xì)胞上的程序性死亡-1（PD-1；CD279）蛋白激活促進(jìn)組織中程序性死亡配體1（PD-L1）的產(chǎn)生。用戶包括了引用，建議包含引用或來(lái)源。

       抑制性共受體PD-1存在于包括B淋巴細(xì)胞、CD8+和CD4+ T細(xì)胞、NK細(xì)胞以及其他亞型的腫瘤浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞（TILs）在內(nèi)的幾種細(xì)胞類(lèi)型表面。用戶提供的數(shù)字引用沒(méi)有文本描述。鑒于長(zhǎng)期抗原暴露可能會(huì)誘導(dǎo)PD-1表達(dá)的選擇性增加，T細(xì)胞PD-1表達(dá)可能表明T細(xì)胞疲勞。由于缺乏信息，無(wú)法對(duì)用戶的材料進(jìn)行學(xué)術(shù)改寫(xiě)。類(lèi)型1跨膜蛋白PD-1由程序性細(xì)胞死亡蛋白1（PDCD1）基因編碼。

       PD-1分子由三個(gè)主要結(jié)構(gòu)元素組成：外部免疫球蛋白可變區(qū)（IgV）結(jié)構(gòu)域、一個(gè)疏水性跨膜區(qū)域，以及幾個(gè)細(xì)胞內(nèi)區(qū)域。細(xì)胞內(nèi)尾部組分包括免疫受體酪氨酸基開(kāi)關(guān)基序（ITSM）和免疫受體酪氨酸基抑制基序（ITIM），兩者都有可能發(fā)生磷酸化。免疫受體PD-1的激活被認(rèn)為需要活性免疫受體酪氨酸基開(kāi)關(guān)基序（ITSMs）的存在以調(diào)節(jié)T細(xì)胞反應(yīng)。

       PD-L2（也稱(chēng)為B7-DC或CD273）和PD-L1（也稱(chēng)為B7-H1或CD274）是作為共抑制因子并構(gòu)成PD-1受體的配體。PD-L1是由CD274基因編碼的蛋白質(zhì)，包含290個(gè)氨基酸，分子量為40 kDa（圖6）。PD-L1是適應(yīng)性免疫反應(yīng)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，可能位于染色體9 p24。

圖6. PD-L1蛋白結(jié)構(gòu)域、mRNA和基因的圖解表示。使用Biorender.com創(chuàng)建。

       CD274基因的啟動(dòng)子區(qū)域包含許多對(duì)IFN-γ有反應(yīng)的成分；因此，CD274在IFN-γ誘導(dǎo)的PD-L1表達(dá)上調(diào)中起著關(guān)鍵作用。PD-L1作為一種跨膜蛋白運(yùn)作，由兩個(gè)細(xì)胞外域（Ig-V和Ig-C）和一個(gè)單一的跨膜區(qū)域組成。PD-L1是一個(gè)簡(jiǎn)短的細(xì)胞質(zhì)域，傳遞細(xì)胞內(nèi)信號(hào)；它由CD274基因編碼，由7個(gè)外顯子組成（圖7），每個(gè)外顯子都編碼蛋白質(zhì)的特定部分。

       外顯子1編碼細(xì)胞內(nèi)和跨膜域、信號(hào)序列以及IgC樣和IgV樣域，而外顯子7編碼3' UTR和細(xì)胞內(nèi)域。PD-L1基因包含七個(gè)外顯子（圖7），PD-L1蛋白由一個(gè)跨膜域、兩個(gè)類(lèi)似于免疫球蛋白C和免疫球蛋白V的細(xì)胞外域，以及一個(gè)單獨(dú)的細(xì)胞內(nèi)域組成。

圖7. PD-L1蛋白結(jié)構(gòu)、mRNA和基因。使用Biorender.com創(chuàng)建。

       5.2.PD-L1調(diào)控

       包括腫瘤細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞在內(nèi)的各種細(xì)胞表達(dá)CD40配體1（PD-L1）。然而，并非所有腫瘤或惡性細(xì)胞都表達(dá)PD-L1，盡管它存在于癌細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和質(zhì)膜中。圖8A顯示了許多啟動(dòng)PD-L1表達(dá)的促炎分子、VEGF、GM-CSF、LPS、TNF-α、I型和II型IFN-γ、IL-4和IL-10細(xì)胞因子。其中，活化的T細(xì)胞釋放最有效的觸發(fā)因子，即IFN-γ，而TGF-β、PTEN和p53抑制PD-L1表達(dá)（圖8B）。與PD-L1不同，PD-L2的表達(dá)僅限于APCs。研究表明，PD-L1表達(dá)受多種信號(hào)通路、轉(zhuǎn)錄因子和表觀遺傳因素的調(diào)控。

圖8. PD-L1調(diào)節(jié)信號(hào)通路。使用Biorender.com創(chuàng)建。

       5.2.1.信號(hào)通路

       A.MAPK通路

       絲裂原激活蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路的激活可能導(dǎo)致PD-L1表達(dá)水平的增加。MAPK通路是非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）中的一個(gè)致癌機(jī)制，通過(guò)激活表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）上調(diào)PD-L1?；熕幬镎T導(dǎo)的癌細(xì)胞PD-L1上調(diào)可能是由于MAPK通路的激活。例如，MEK抑制劑U0126消除了紫杉醇誘導(dǎo)的PD-L1表達(dá)，而順鉑濃度通過(guò)MAPK激活觸發(fā)PD-L1表達(dá)。

       B.PI3K/Akt通路

       磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/Akt通路已被涉及在癌細(xì)胞中PD-L1的調(diào)控，因?yàn)橐汛_定PI3K抑制劑降低了BRAF抑制劑耐藥黑色素瘤細(xì)胞中的PD-L1表達(dá)。例如，Akt抑制消除了PTEN耗竭時(shí)發(fā)生的PD-L1增加。通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路的PD-L1增加伴隨著轉(zhuǎn)錄上調(diào)以及翻譯后過(guò)程；在結(jié)腸癌細(xì)胞中，Akt的刺激導(dǎo)致PD-L1蛋白過(guò)表達(dá)，與PD-L1 mRNA表達(dá)水平無(wú)關(guān)。ePI3K/Akt通路的轉(zhuǎn)錄和翻譯后機(jī)制調(diào)節(jié)各種細(xì)胞和組織以控制PD-L1表達(dá)。盡管下游效應(yīng)子mTOR/S6尚未被證明介導(dǎo)Akt對(duì)PD-L1表達(dá)的作用，但Akt的抑制導(dǎo)致PD-L1表達(dá)減少。相比之下，PD-L1表達(dá)由Akt的下游靶標(biāo)核因子NF-B調(diào)節(jié)，PD-L1的轉(zhuǎn)錄增加是由于Akt激活NF-B。

       C.JAK-STAT信號(hào)通路

       STAT通路被生長(zhǎng)因子、IFNs、細(xì)胞因子和類(lèi)似化學(xué)物質(zhì)激活，并被認(rèn)為是一個(gè)進(jìn)化上保守的過(guò)程。這種策略為細(xì)胞提供了一個(gè)控制基因表達(dá)的關(guān)鍵工具，并代表了細(xì)胞如何響應(yīng)其環(huán)境并解釋信號(hào)以調(diào)節(jié)增殖和分裂的基本示例。最近的研究表明，腫瘤通過(guò)JAK/STAT系統(tǒng)制造PD-L1，根據(jù)Doi等人的研究，PD-L1表達(dá)可能通過(guò)使用JAK2抑制劑AG490在蛋白和mRNA水平上被阻斷。這些結(jié)果支持JAK/STAT通路調(diào)節(jié)PD-L1表達(dá)的觀點(diǎn)。此外，成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體（FGFR）2信號(hào)通過(guò)JAK/STAT3信號(hào)通路的有效激活與體外PD-L1表達(dá)的升高相對(duì)應(yīng)。結(jié)直腸癌的異種移植模型揭示了FGFR2的過(guò)表達(dá)加速了腫瘤發(fā)展，并導(dǎo)致PD-L1表達(dá)激增。減輕這種影響的一種可能策略是使用JAK抑制劑來(lái)阻礙JAK/STAT3通路。

       D.WNT信號(hào)通路

       以前的研究表明，WNT信號(hào)的失調(diào)與腫瘤的發(fā)展、細(xì)胞從癌癥到惡性的轉(zhuǎn)變以及對(duì)傳統(tǒng)癌癥治療的抵抗密切相關(guān)。異常的WNT信號(hào)破壞了癌癥免疫監(jiān)測(cè)的過(guò)程，導(dǎo)致免疫逃逸和對(duì)免疫療法的敏感性降低，包括免疫檢查點(diǎn)抑制劑。例如，在缺乏WNT配體的情況下，非糖基化的PD-L1在乳腺癌小鼠模型中沿GSK3B-β-TrCP軸的活躍信號(hào)時(shí)顯示出加速的蛋白酶體降解。然而，GSK3阻斷劑通過(guò)降低動(dòng)物黑色素瘤模型中PDCD1基因表達(dá)來(lái)增加腫瘤根除。WNT活性與PD-L1表達(dá)之間的功能相互作用允許使用特定的WNT抑制劑或激活劑來(lái)治療三陰性乳腺癌，以分別降低或提高PD-L1表達(dá)。

       E.NF-κB信號(hào)通路

       已經(jīng)提出，Toll樣受體（TLRs）或IFN-γ驅(qū)動(dòng)的核因子（NF）-κB刺激PD-L1基因表達(dá)。姜黃素是一種NF-κB抑制劑，當(dāng)與抗CTLA-4檢查點(diǎn)抑制藥物聯(lián)合使用時(shí)，可以抑制黑色素瘤、乳腺癌和結(jié)腸癌細(xì)胞系的生長(zhǎng)。抑制腫瘤細(xì)胞的生存和增殖，并針對(duì)腫瘤內(nèi)的免疫檢查點(diǎn)可能抑制NF-κB，這可能涉及LMP1誘導(dǎo)的PD-L1表達(dá)，因?yàn)榭Х人岜揭阴ィㄒ环NNF-κB抑制劑）減少了PD-L1誘導(dǎo)。除了INF-γ，轉(zhuǎn)錄因子NF-κB是PD-L1表達(dá)的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，已被證明成功減少I(mǎi)FN誘導(dǎo)的PD-L1表達(dá)，而STAT3、PI3K和MAPK抑制劑未能實(shí)現(xiàn)相同的結(jié)果。Peng等人發(fā)現(xiàn)，化療導(dǎo)致卵巢癌患者PD-L1水平更高，這是由于NF-κB介導(dǎo)的局部免疫抑制。

       5.2.2.Hedgehog信號(hào)通路

       近期的治療進(jìn)展集中在使用小分子抑制劑，如SMO和GLI，來(lái)修改Hedgehog（Hh）信號(hào)通路。該通路被認(rèn)為對(duì)基質(zhì)細(xì)胞的增殖至關(guān)重要，其功能的偏差可能導(dǎo)致腫瘤的發(fā)展。此外，Hh信號(hào)可能在調(diào)節(jié)PD-L1生產(chǎn)中發(fā)揮作用，Hh信號(hào)的抑制可能在淋巴細(xì)胞中引起抗腫瘤活性。根據(jù)Chakrabarti等人的研究，特定患者應(yīng)該接受一種聯(lián)合治療方法，既針對(duì)Hh信號(hào)也針對(duì)免疫學(xué)檢查點(diǎn)，因?yàn)镠h信號(hào)參與了PD-1/PD-L1的抑制，這導(dǎo)致Gli2誘導(dǎo)的耐受性和胃癌中PD-L1表達(dá)的逆轉(zhuǎn)。

       5.3.PD-1/PD-L1信號(hào)

       許多研究報(bào)告稱(chēng)，通過(guò)PD-L1和PD-1之間的相互作用傳遞免疫病理學(xué)和免疫耐受抑制信號(hào)。PD-1/PD-L1信號(hào)可以通過(guò)磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、T細(xì)胞受體（TCR）和磷酸酶-1（SHP-1）信號(hào)通路阻礙免疫反應(yīng)（圖9）。PD-L1對(duì)效應(yīng)T細(xì)胞的作用和PD-1抑制TCR信號(hào)傳導(dǎo)，進(jìn)而抑制T細(xì)胞的細(xì)胞毒性。當(dāng)SHP-1被抑制時(shí)，免疫受體酪氨酸基開(kāi)關(guān)基序（ITSM）和酪氨酸基抑制基序（ITIM）的活動(dòng)可能增強(qiáng)，由鈉鎢酸鹽控制的CD8+ T細(xì)胞活性。PD-1的ITSM基序可能被ITSM酪氨酸磷酸化，然后運(yùn)送SHP-2和SHP-1到ITSM基序。在這種吸收之后，信號(hào)通路阻止樹(shù)突細(xì)胞和T細(xì)胞的相互作用，并抑制停止信號(hào)。最后，阻斷TCR信號(hào)傳輸抑制了MAPK和PI3K/Akt信號(hào)。此外，Akt的激活和PI3K的抑制減少了B細(xì)胞淋巴瘤超大（Bcl-xl）表達(dá)，進(jìn)而增加了T細(xì)胞凋亡。

圖9. PD-1/PD-L1信號(hào)減少CD8+ T細(xì)胞的增殖、存活和細(xì)胞因子產(chǎn)生 。使用Biorender.com創(chuàng)建。

       PD-L1阻斷了Ras/MEK/ERK和PI3K/Akt通路，這阻止了T細(xì)胞的激活和對(duì)T細(xì)胞存活至關(guān)重要的轉(zhuǎn)錄因子的運(yùn)作。PD-1和PD-L1之間的相互作用可能抑制T-bet和GATA-3的表達(dá)。GATA-3轉(zhuǎn)錄因子參與Th2細(xì)胞的產(chǎn)生，而T-bet轉(zhuǎn)錄因子可能通過(guò)結(jié)合T盒區(qū)域增強(qiáng)T細(xì)胞增殖。

       然而，目前尚不清楚所有類(lèi)型的癌癥是否都使用PD-L1信號(hào)的確切機(jī)制，因?yàn)橐恍┌┌Y類(lèi)型的預(yù)后不同，可能由于涉及不同的PD-L1機(jī)制。

       6.PD-1/PD-L1在癌癥中的功能

       6.1.乳腺癌

       PD表達(dá)已與人類(lèi)乳腺癌干細(xì)胞（BCSCs）中的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）相關(guān)聯(lián)。與細(xì)胞系相比，MCF-7和BT-549腫瘤球中PD-L1表達(dá)的增加可能部分歸因于PD-L1啟動(dòng)子區(qū)域內(nèi)的去甲基化。此外，腫瘤中組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶的過(guò)表達(dá)可以加速PD-L1轉(zhuǎn)錄。與細(xì)胞系相比，PD-L1啟動(dòng)子區(qū)域內(nèi)慢速組蛋白的分布不太明顯。這些結(jié)果表明PD-L1在BCSCs中具有重要功能。

       最近的病理學(xué)調(diào)查確定，多種亞型的雌激素受體（ER）α陰性BC含有增加的PD-L1水平。劉等人發(fā)現(xiàn)ERα陰性和ERα陽(yáng)性乳腺癌細(xì)胞系之間PD-L1 mRNA的平均表達(dá)存在顯著差異。因此，研究了ER陰性（MDA-MB-231和BT549）和ER陽(yáng)性乳腺癌細(xì)胞系（MCF7和T47D）中PD-L1的表達(dá)。根據(jù)RT-qPCR和西方印跡研究，T47D和MCF7細(xì)胞中PD-L1的蛋白和mRNA水平顯著低于MDA-MB-231和BT549細(xì)胞）。最近的研究表明，PD-L1抑制癌細(xì)胞的發(fā)展，當(dāng)PD-L1被沉默時(shí)，BC細(xì)胞中阿霉素誘導(dǎo)的和自發(fā)的死亡增加。

       7.癌癥中PD-1/PD-L1的抑制劑

       使用PD-1/PD-L1靶向療法可能顯著減緩癌癥進(jìn)展。圖10概述了一些關(guān)鍵方案，以增強(qiáng)癌癥治療。

圖10. 惡性腫瘤中的PD-1/PD-L1抑制劑 。使用Biorender.com創(chuàng)建。

       1.Pembrolizumab

       Joseph等人發(fā)現(xiàn)，Pembrolizumab對(duì)肺轉(zhuǎn)移的治療有效性（62%）顯著高于其對(duì)肝轉(zhuǎn)移的治療效果（22%）。肺和肝轉(zhuǎn)移患者的一年總生存率分別為89%和53%。被診斷為轉(zhuǎn)移性鱗狀細(xì)胞癌（SCCHN）和/或頭頸部復(fù)發(fā)的患者總體生存率有限，通常不超過(guò)六個(gè)月。在頭頸部區(qū)域使用抗PD-1檢查點(diǎn)藥物進(jìn)行免疫治療已增加了生存率和腫瘤反應(yīng)。在單臂II期KEYNOTE-055試驗(yàn)和Ib期KEYNOTE-012試驗(yàn)中，Pembrolizumab治療的轉(zhuǎn)移性和復(fù)發(fā)患者的反應(yīng)率為18%，中位OS為6至8個(gè)月。此外，HER2陽(yáng)性、曲妥珠單抗耐藥和PD-L1陽(yáng)性BC患者已用Pembrolizumab和曲妥珠單抗治療。

       2.Nivolumab

       完全人源單克隆抗體Nivolumab可以抑制PD-L1和PD-1之間的相互作用。趙等人描述了一個(gè)案例，一名晚期肝肉瘤患者在阿帕替尼和Nivolumab治療后部分緩解。然而，在治療過(guò)程中，3級(jí)氨基轉(zhuǎn)移酶水平顯著升高。因此，在考慮聯(lián)合治療時(shí)應(yīng)謹(jǐn)慎，并在批準(zhǔn)實(shí)施前進(jìn)行全面評(píng)估潛在風(fēng)險(xiǎn)。CheckMate 275 2期臨床試驗(yàn)的結(jié)果表明，先前治療中對(duì)基于鉑的化療表現(xiàn)出耐藥性的晚期尿路上皮癌患者可能在使用Nivolumab后有良好結(jié)果。與基于鉑的化療后可用的少數(shù)化療選擇相比，免疫治療有許多優(yōu)勢(shì)之一是其治療效果的持久性增加。其他試驗(yàn)的長(zhǎng)期生存率證實(shí)了這一點(diǎn)，包括3期CheckMate 057（n=582）和CheckMate 017（n=272）試驗(yàn)。這些研究比較了先前治療過(guò)的晚期非鱗狀NSCLC中多西他賽和Nivolumab的有效性。在CheckMate 057和017試驗(yàn)組中，多西他賽的預(yù)測(cè)3年總生存率為8%，而非鱗狀NSCLC患者為17%，預(yù)測(cè)的2年OS率，多西他賽為8%，而鱗狀NSCLC分別為16%和29%，分別為多西他賽和Nivolumab。

       3.JQ1

       劉等人研究了JQ1對(duì)多種癌細(xì)胞系和從腎細(xì)胞癌衍生的原代培養(yǎng)細(xì)胞中PD-L1蛋白和mRNA表達(dá)的影響。這些癌細(xì)胞系包括多種惡性腫瘤，包括前列腺、肺和肝腫瘤。這些作者報(bào)告稱(chēng)，JQ1對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有劑量依賴性的抑制作用。在用JQ1處理后，肺、肝、前列腺和腎癌細(xì)胞系的原代培養(yǎng)中觀察到PD-L1表達(dá)減少。此外，在用JQ1處理的細(xì)胞中還觀察到PD-L2水平的下降。因此，JQ1似乎有能力調(diào)節(jié)PD-1/PD-L1軸。

       4.Cemiplimab

       使用PD-1抑制劑在治療晚期皮膚鱗狀細(xì)胞癌（cSCC）方面取得了積極成果。Cemiplimab是一種單克隆抗體，能夠結(jié)合程序性死亡受體-1（PD-1），抑制其與PD-L2和PD-L1的相互作用。2018年9月，食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)Cemiplimab用于治療局部晚期轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者，這些患者不適合放射治療或手術(shù)。

       5.Atezolizumab

       Atezolizumab是一種經(jīng)過(guò)人源化設(shè)計(jì)的單克隆抗體，旨在選擇性地抑制PD-L1與其受體B7.1和PD-1之間的相互作用。這種化合物增強(qiáng)了T細(xì)胞對(duì)腫瘤狀況的免疫反應(yīng)。Atezolizumab單藥治療已成為轉(zhuǎn)移性NSCLC和UC的潛在治療選擇。最近，IMmotion 151 3期研究比較了舒尼替尼與貝伐珠單抗（抗VEGF）和Atezolizumab作為結(jié)直腸癌可能的一線治療。根據(jù)免疫組化，貝伐珠單抗/Atezolizumab實(shí)現(xiàn)了其共同主要目標(biāo)之一，即在與舒尼替尼相比，表達(dá)PD-L1的腫瘤浸潤(rùn)免疫細(xì)胞≥1%的晚期結(jié)直腸癌患者中顯示出更好的研究者評(píng)估的PFS。

       6.Avelumab

       單克隆人IgG1抗體Avelumab抑制PD-L1受體。1b期研究（JAVELIN Solid Tumor）顯示，先前接受過(guò)治療的復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移性NSCLC患者的腫瘤和免疫細(xì)胞中PD-L1表達(dá)減少。包括55名晚期腎細(xì)胞癌患者的1b期、非隨機(jī)試驗(yàn)結(jié)果顯示，阿西替尼和Avelumab的聯(lián)合使用是有效的。具體來(lái)說(shuō)，58%的患者有成功的反應(yīng)，78%的患者病情得到控制。

       8.結(jié)論

       PD-1/PD-L1的結(jié)合對(duì)許多惡性腫瘤至關(guān)重要；因此，需要在這一領(lǐng)域進(jìn)行更多的研究。根據(jù)所提供的證據(jù)，這種結(jié)合在癌癥治療中既提供了機(jī)會(huì)也帶來(lái)了挑戰(zhàn)。由于許多實(shí)體癌癥，特別是乳腺癌，表達(dá)高水平的PD-1/PD-L1，癌癥治療主要涉及靶向療法。免疫療法的有希望的發(fā)現(xiàn)表明，這種治療可能會(huì)延長(zhǎng)特定患者的生存期。PD-1/PD-L1免疫療法阻斷可能是各種癌癥類(lèi)型的下一個(gè)合理的進(jìn)展；然而，還有許多因素尚待確定，包括劑量、持久性、有效性和安全性。