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中藥鑒定新技術(shù)新方法的研究進(jìn)展

熱門推薦: 分子鑒定 新技術(shù) 中藥鑒定
作者:小米蟲  來源:CPHI制藥在線
  2024-01-30
中藥鑒定是中藥研究的基礎(chǔ),在傳統(tǒng)的中藥鑒定中,中藥材主要通過形狀、顏色鑒別和氣味等方法進(jìn)行藥材鑒定。

中藥鑒定新技術(shù)新方法的研究進(jìn)展

       中藥鑒定是中藥研究的基礎(chǔ),在傳統(tǒng)的中藥鑒定中,中藥材主要通過形狀、顏色鑒別和氣味等方法進(jìn)行藥材鑒定。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,傳統(tǒng)的中藥鑒定方法已不能滿足現(xiàn)代中藥鑒定的需要,中藥鑒定的方法也不斷更新,出現(xiàn)了許多新技術(shù)和新方法,如 DNA分子標(biāo)記法、生物傳感器、色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、光譜技術(shù)等。這些新技術(shù)不僅為中藥鑒定提供了科學(xué)依據(jù),同時也推動了中藥鑒定方法的發(fā)展。

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       1、DNA分子鑒定技術(shù)

       DNA 分子鑒定技術(shù)是最為常見的分子鑒定技術(shù),在中藥鑒定過程中可以根據(jù)DNA分子技術(shù),對生物個體中的特異 DNA 片段進(jìn)行有效反應(yīng),此種鑒定方式具有較高的準(zhǔn)確性,不會受到較多外界因素的干擾,可以較為準(zhǔn)確地反映出中藥材的實際情況。DNA分子鑒定具有快速、準(zhǔn)確、高效等優(yōu)點,其檢測技術(shù)包括聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、基因芯片和微陣列芯片等。近年來,隨著 PCR 技術(shù)和芯片技術(shù)的發(fā)展,DNA分子鑒定技術(shù)得到了長足的進(jìn)步,已廣泛應(yīng)用于中藥的鑒定,尤其是 DNA 條形碼技術(shù),因其具有 DNA 序列信息豐富、準(zhǔn)確可靠、不受物種限制等優(yōu)點,在中藥材品種鑒別上有廣泛應(yīng)用。DNA 條形碼技術(shù)的研究還處于初級階段,需要進(jìn)一步完善和發(fā)展,目前常用的 DNA 分子鑒定技術(shù)有隨機擴增多態(tài)性 DNA(RAPD)、PCR 等。

       2、蛋白質(zhì)標(biāo)記技術(shù)

       蛋白質(zhì)標(biāo)記技術(shù)包括蛋白質(zhì)電泳、同工酶、蛋白飛行時間、抗血清等鑒別技術(shù)。蛋白質(zhì)電泳鑒別常用于果實種子、動物類藥材鑒別,利用藥材中攜帶的電荷與蛋白質(zhì)分子形狀、大小的不同進(jìn)行電源分析,從而能夠有效鑒定出不同種類的中藥材。同工酶鑒別技術(shù)是因為不同類型的中藥材中一般含有不同的同工酶分子結(jié)構(gòu),同時藥材的免疫活性也不盡相同,因此可利用同工酶技術(shù)鑒別中藥材中的同工酶分子結(jié)構(gòu),根據(jù)差別完成不同中藥材的鑒定。蛋白飛行時間質(zhì)譜鑒定技術(shù)是對中藥動物類含中藥蛋白質(zhì)/肽成分比較常用的質(zhì)量指紋圖譜的鑒別方法??寡彖b別技術(shù)主要鑒別藥物中的蛋白質(zhì)等抗原性物質(zhì),在中藥中很多都含有多糖、蛋白質(zhì)等抗原性物質(zhì),采用蛋白質(zhì)標(biāo)記技術(shù)的抗血清鑒別技術(shù)能利用以上抗原性物質(zhì),制備出相應(yīng)的特異性物質(zhì),再通過酶聯(lián)免疫吸附法對物質(zhì)進(jìn)行檢驗,從而能夠真實反映出重要的實際情況,有利于臨床上的鑒定和使用。

       3、生物傳感器

       生物傳感器是一種利用生物分子之間的相互作用來檢測待測物質(zhì)含量的一種檢測儀器。與傳統(tǒng)的檢測方法相比,生物傳感器具有靈敏度高、操作簡單、無損傷、成本低等特點。因此,生物傳感器在中藥鑒定中也得到了廣泛的應(yīng)用。以生物傳感器為基礎(chǔ)的技術(shù)主要有免疫學(xué)檢測技術(shù)和分子雜交技術(shù)等。免疫學(xué)檢測技術(shù)主要是通過將待測物與抗原或抗體結(jié)合,形成相應(yīng)的復(fù)合物,再用固定化抗原或抗體對其進(jìn)行定量檢測。分子雜交技術(shù)則是利用待測物質(zhì)與相關(guān)分子特異性結(jié)合形成復(fù)合物,利用分子間相互作用來測定待測物質(zhì)含量。

       4、色譜技術(shù)

       高效液相色普技術(shù)在中藥材鑒定中具有較高的分離效果,可有效鑒別表征中藥材小分子化學(xué)成分的數(shù)量與特征,以及不相同量溶劑和不同提取分析方式可有效剔除干擾因素,把微量以富集方式呈現(xiàn),可獲取中藥材中多種分子化學(xué)特征指紋。但高效液相色普技術(shù)需要大量的中藥材樣本,且對于不相同的中藥材鑒定需要結(jié)合不同的固定相、流動相、檢測方法,在鑒定方法上通用性極差,加之儀器的影響。高效液相色普技術(shù)使用于中藥飲片鑒定中有較高的效果。氣相色譜法是依據(jù)不相同化合物在固定氣體流與固定相之間的不同分配情況對藥材進(jìn)行分析,臨床常用于檢測氣體類、易揮發(fā)類、半揮發(fā)類等物體,程序升溫法是鑒定氣相色譜法的主要方法。氣相色譜法主要是鑒定中藥熱穩(wěn)定與揮發(fā)性的化學(xué)成分,是高效液相色普的補充,但該鑒定方法沒有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的色譜條件,因此在鑒定中無法獲取較好的結(jié)果。色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)是將液相色譜、氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用而形成的一種快速分析技術(shù)。色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用,為中藥鑒定提供了一種新的方法,極大地推動了中藥鑒定技術(shù)的發(fā)展。但是該方法也存在一定缺陷,如樣品量小、分析速度慢、樣品前處理復(fù)雜等,這些缺陷限制了該技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用。

       5、光譜分析

       光譜技術(shù)是根據(jù)物質(zhì)吸收不同波長的光,通過一定的數(shù)學(xué)運算和處理,把被測物質(zhì)的物理量轉(zhuǎn)化為譜圖信息,并以圖譜來描述其特征的一種分析方法。它不僅可用于研究物質(zhì)結(jié)構(gòu),而且還能識別和鑒定物質(zhì)成分。光譜分析法具有檢測速度快、分析周期短、適用范圍廣、操作簡便等優(yōu)點。目前光譜分析方法主要有紫外可見分光光度法(UV)、熒光分光光度法(FL)、紅外光譜法(IR)、核磁共振法(NMR)、分子印跡聚合物指紋圖譜技術(shù)(MAS)、超分辨率激光衍射光譜儀(UPLC-DA)等。光譜技術(shù)在中藥鑒定中應(yīng)用較多,它可以對藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣進(jìn)行鑒定,如紅外光譜法可用于鑒別不同產(chǎn)地中藥材,紫外-可見分光光度法可用于中藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣鑒別等。

       6、指紋圖譜

       指紋圖譜是指不同藥材或同一藥材不同部位之間存在著共有的化學(xué)成分和相同的色譜峰,利用這些共有的化學(xué)成分和色譜峰,通過一定的數(shù)學(xué)模型計算,可以看出這些共有化學(xué)成分與該藥材中所含其他成分的區(qū)別,從而對中藥進(jìn)行鑒別。指紋圖譜是中藥材鑒定和質(zhì)量控制的重要方法之一,主要包括色譜指紋圖譜、顯微指紋圖譜和生物活性指紋圖譜。其中色譜指紋圖譜是中藥材鑒定的主要方法之一,也是目前應(yīng)用最為廣泛的中藥鑒定方法。色譜指紋圖譜技術(shù)具有操作簡便、快速、重現(xiàn)性好以及通用性強等優(yōu)點,已被廣泛應(yīng)用于中藥鑒定。隨著色譜技術(shù)的不斷進(jìn)步,其在中藥鑒定中的應(yīng)用也越來越廣泛,如中藥化學(xué)成分指紋圖譜、中藥色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、分子印跡技術(shù)以及質(zhì)譜技術(shù)等。通過不同方法的結(jié)合應(yīng)用,可將不同種類和產(chǎn)地的中藥材進(jìn)行區(qū)分鑒定。

       傳統(tǒng)中藥鑒定方法主要是通過眼觀藥材形狀、手摸以及聞氣味等來判斷藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣,容易受主觀人為因素的影響,準(zhǔn)確性也不能得到保證?;诜肿铀降闹兴庤b定新方法在中藥材的真?zhèn)舞b定方面已經(jīng)取得了一些成果,DNA條形碼技術(shù)在中藥材的物種鑒定中得到了廣泛應(yīng)用,通過建立中藥材標(biāo)準(zhǔn)序列的DNA條形碼數(shù)據(jù)庫,以及檢測標(biāo)記的篩選、獲得和檢測,可以逐步實現(xiàn)中藥材物種鑒定的標(biāo)準(zhǔn)化。同時,隨著中藥指紋圖譜技術(shù)和質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)體系的建立,中藥材的質(zhì)量和安全性也得到了進(jìn)一步保證。

       參考資料

       [1]羅倫,冉會敏.淺論中藥鑒定學(xué)新技術(shù)新方法的研究進(jìn)展[J].臨床醫(yī)藥文獻(xiàn)電子雜志,2019,6(37):189+191.

       [2] 周正禮.中藥鑒定技術(shù)新技術(shù)新方法的研究進(jìn)展[J].中國科技期刊數(shù)據(jù)庫 醫(yī)藥,2023,(第7期).

       作者簡介:小米蟲,藥品質(zhì)量研究工作者,長期致力于藥品質(zhì)量研究及藥品分析方法驗證工作,現(xiàn)就職于國內(nèi)某大型藥物研發(fā)公司,從事藥品檢驗分析及分析方法驗證。

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