纖維素酶廣泛存在于自然界的生物體中,纖維素酶種類繁多,來源很廣。不同來源的纖維素酶其結(jié)構(gòu)和功能相差很大。由于真菌纖維素酶產(chǎn)量高、活性大,故在畜牧業(yè)和飼料工業(yè)中應用的纖維素酶主要是真菌纖維素酶。下面簡單介紹以下纖維素酶的測定方法,希望大家對于這種飼料添加劑有更多的認識。
纖維素酶測定方法:
1、纖維素酶活的測定蠶蛹DNS法,即首先以葡萄糖的μmoL數(shù)為橫坐標,OD值為縱坐標,繪制標準曲線。
2、然后取3支帶有25ml刻度的試管,一支管作空白對照,2支管作平行樣品管,每支樣品管中加1ml酶溶液,置于50℃水浴鍋中預熱2min;再加入4ml已預熱至50℃底物溶液(0.625gCMC溶于100ml PH4.6的醋酸緩沖液中加熱,溶解,混勻)精確反應5min;
3、然后在3支試管中立即分別加入1ml2mol、氫氧化鈉溶液和2mlDNS顯色液,搖勻后將支試管放入沸水浴中5min后立即取出冷水冷卻;
4、然后在對照管中再加入1ml酶液,再用蒸餾水定容至25ml,于490nm處測OD值;
5、酶活力計算:從標準曲線中查出葡萄糖μmoL數(shù),酶活力(U)=葡萄糖量/(5X EW)
以上就是纖維素酶的測定方法,流程相對較多,對于操作者的技術(shù)要求也較高。為了確保實驗的準確率,是多操作幾遍以進行科學的證明。近些年來,隨著中性纖維素酶和堿性纖維素酶在棉織品水洗整理工藝及洗滌劑工業(yè)中的成功應用,細菌纖維素酶制劑已顯示出良好的應用前景。
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