要論最近新藥研發(fā)的“當(dāng)紅炸子雞”非KRAS莫屬。歷經(jīng)數(shù)十年的研究，隨著兩款KRAS G12C抑制劑AMG510（Amgen）和MRTX849（Mirati）（圖1）成功上市，KRAS突變基因“不可成藥性”靶點(diǎn)正式宣告終結(jié)。國內(nèi)外新藥研發(fā)公司也都紛紛跟進(jìn)加入到這場研發(fā)競賽當(dāng)中。近期信達(dá)生物和勁方醫(yī)藥達(dá)成約3.12億美元的獨(dú)家授權(quán)協(xié)議更是引爆了國內(nèi)市場。

       KRAS在腫瘤治療領(lǐng)域的重要性無需多說。本文從眾多KRAS G12C的專利著手，選取了一些有意思的結(jié)構(gòu)來窺探不同公司的設(shè)計(jì)理念。

       01

       AstraZeneca

       WO2019110751A1

       從通式（圖2左）上來看，AZ最主要的設(shè)計(jì)思路就是將哌嗪環(huán)與母核連接形成四環(huán)系統(tǒng)（圖2右）。其研發(fā)團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)4-哌嗪喹唑啉的活性構(gòu)象大約為312o，而該Hit分子的最 低能量構(gòu)象分別為60o，150 o ~ 210 o和300 o。于是先將哌嗪環(huán)與喹唑啉連接得到醚類四元環(huán)。通過用F代苯酚替換吲唑降低了化合物的Log D，同時(shí)在母核的8位引入F原子將苯酚鎖定在活性構(gòu)型。接下來將醚類的四元環(huán)優(yōu)化成了內(nèi)酰胺，由此進(jìn)一步降低了化合物的Log D，并且活性得到了保持。最后在哌嗪的5位引入甲基，使得化合物的活性得到了極大的增強(qiáng)，并且生物利用度也得到了改善。AZ在其文章中解釋道由于甲基的引入，可以將結(jié)合口袋內(nèi)的水分子擠出，進(jìn)一步的增強(qiáng)了分子與蛋白的結(jié)合能力（與MRTX849中的氰基作用類似）。

       WO2018206539A1

       AZ的這篇專利也同樣利用了上述類似的設(shè)計(jì)理念，只是關(guān)環(huán)的方向不同（圖3）。

       02

       Eli Lilly

       WO2020081282A1

       禮來的這篇專利母核其實(shí)并沒有太強(qiáng)的新穎性，但是其創(chuàng)造性的開發(fā)了苯并噻唑胺這樣一個(gè)片段取代了原先的藥效團(tuán)氟代苯酚（圖4）。其中代表化合物1不僅具有納摩爾級(jí)的體外活性，而且也展現(xiàn)出了優(yōu)異的體內(nèi)抑瘤活性。該專利化合物（未披露具體結(jié)構(gòu)）曾一度進(jìn)入臨床，后因?yàn)?*問題退出。

       WO2021118877A1

       禮來最近公開的專利結(jié)構(gòu)（圖5）與AZ的WO2018206539A1很相似。筆者猜測可能是禮來借鑒了AZ的理念，結(jié)合自己開發(fā)的優(yōu)勢片段衍化出的一系列新的活性結(jié)構(gòu)（圖5）。專利中披露的代表化合物35在體外和體內(nèi)的活性都讓人眼前一亮（具體見專利）。自上次退出KRAS臨床之后，近日禮來又強(qiáng)勢回歸競爭行列。其在AACR2021年會(huì)上公布了新一代KRAS G12C抑制劑LY3537982的臨床前活性數(shù)據(jù)：對(duì)KRAS G12C突變的H23、H358肺癌細(xì)胞株IC50分別為1.04 nM和1.16 nM，優(yōu)于AMG 510和MRTX849。作者認(rèn)為該化合物很可能出自這篇專利。

       03

       Incyte

       WO2021142252A1

       Incyte公司研發(fā)設(shè)計(jì)思路和AZ有著異曲同工之妙。不同點(diǎn)是AZ是把哌嗪環(huán)與母核連接形成了四環(huán)系統(tǒng)，而Incyte通過N原子構(gòu)建了三并環(huán)系統(tǒng)（圖6）。由于專利沒有給出具體活性數(shù)據(jù)，也沒有文章報(bào)道，我們很難了解這類化合物的真實(shí)表現(xiàn)和結(jié)合角度，但這種化合物的設(shè)計(jì)思路依然是突破專利的有效手段。

       04

       MSD

       WO2021086833A1

       默沙東的這篇專利策略很明確：在AMG510的基礎(chǔ)上通過柔性linker將母核下方的芳環(huán)與母核左側(cè)的芳環(huán)連成一個(gè)大環(huán)（圖7）。這種改造不僅成功突破安進(jìn)的專利，也發(fā)現(xiàn)了一些活性不錯(cuò)的化合物，其中部分化合物都達(dá)到了納摩爾級(jí)。作者也發(fā)現(xiàn)國內(nèi)包括藥明康德等一些企業(yè)也做了類似的改造，但相當(dāng)大概率已經(jīng)落入默沙東的專利范圍。

       05

       Novartis

       WO2021120890A1

       諾華的臨床化合物JDQ44正是出自這篇專利。通過分析專利化合物的結(jié)構(gòu)，作者認(rèn)為JDQ44可能是基于AMG510拓?fù)湫螤畹墓羌苘S遷（圖8）。雖然從二維上來看兩者的結(jié)構(gòu)差別很大，但兩者在空間形狀和伸展方向上還是非常一致的。這種骨架躍遷的方式一般難度很大，但是產(chǎn)生的結(jié)構(gòu)新穎性非常強(qiáng)。

       06

       豪森

       WO2020239077A1

       豪森是國內(nèi)很早布局KRAS的藥企，也申請(qǐng)了多個(gè)KRAS專利?？v覽整篇專利，可以發(fā)現(xiàn)其中包含了眾多不同結(jié)構(gòu)類型的KRAS抑制劑，部分化合物和其他公司專利重合。由于篇幅的原因，本文選取了專利中最重要的化合物165-1做簡述（圖9）。

       實(shí)施例165-1基本保留了AMG510的骨架結(jié)構(gòu)，最 大的區(qū)別在于吡啶4位用S甲醚替代了AMG510相同位置的甲基。從體外活性上來看，實(shí)施例165-1對(duì)NCI-H358和Mia PaCa-2細(xì)胞株IC50分別為6.6 nM和3.3 nM，與AMG510相當(dāng)。在KRAS-G12C突變的人肺癌NCI-H358模型中，165-1在10 mg/kg QD下能顯著抑制腫瘤生長，好于同等劑量下AMG510（圖10）。而且該化合物的血漿穩(wěn)定性，腫瘤/血漿暴露量等都要優(yōu)于AMG510，并且hERG、DDI等安全風(fēng)險(xiǎn)小。眾多參數(shù)加持讓人不禁猜測165-1是否就是豪森的PCC化合物呢？

       WO2020239123A1

       豪森的這篇專利保護(hù)范圍也非常寬泛，化合物的結(jié)構(gòu)類型也很多。但是作者發(fā)現(xiàn)其中有兩類母核結(jié)構(gòu)與AZ的兩篇專利思路非常相近（圖11）：直接在AMG510的骨架基礎(chǔ)上運(yùn)用AZ的設(shè)計(jì)策略。雖然代表化合物的具體活性數(shù)據(jù)并未給出，但可以預(yù)料到應(yīng)該是具有非常好的潛力。

       07

       勁方醫(yī)藥

       WO2020221239

       勁方醫(yī)藥也是國內(nèi)跟進(jìn)KRAS非常早的公司。從這篇專利的通式和代表化合物可以看出勁方也是借鑒了AZ的設(shè)計(jì)理念（圖12）：在AMG510的骨架上運(yùn)用AZ的構(gòu)環(huán)策略（與豪森相同）。專利給出的化合物活性數(shù)據(jù)也是非常亮眼，很多化合物的IC50都達(dá)到了納摩爾級(jí)，個(gè)別甚至小于1 nM。然而對(duì)比上述豪森的專利，某些專利化合物的重合度非常高，不知道最終的專利授權(quán)會(huì)花落誰家。

       WO2021083167A1

       勁方醫(yī)藥的這篇專利也是借鑒了AZ（圖13）：直接在AMG510的骨架上運(yùn)用AZ的內(nèi)酰胺四元環(huán)的設(shè)計(jì)理念。相比上一篇專利，這篇專利做了非常深入的體內(nèi)外研究。其中代表化合物Z25-2和Z27-2對(duì)NCI-H358和Mia PaCa-2細(xì)胞株展現(xiàn)出與AMG510相當(dāng)?shù)囊种苹钚?，而且在PK和PD（圖14）兩個(gè)體內(nèi)評(píng)價(jià)中都要明顯好于AMG510，展現(xiàn)出Me better的潛質(zhì)。然而還是同樣的問題，這篇專利似乎也與豪森的專利重疊。不僅如此，勁方醫(yī)藥的這篇專利也和CN112300194A（上海凌達(dá)生物醫(yī)藥有限公司）重疊，Z27-2更是與其中的實(shí)施例7極度“相似”。不知這三家公司是如何評(píng)估這些專利撞車的。

       目前國內(nèi)外對(duì)于KRAS的新藥研究如火如荼，賽道相對(duì)擁擠。作者在調(diào)研專利的過程中也發(fā)現(xiàn)同質(zhì)化競爭嚴(yán)重、專利撞車頻繁，造成了極大的研發(fā)資源和臨床資源的浪費(fèi)。藥企如果不能立足自身優(yōu)勢制定有效的研發(fā)策略，未來將會(huì)面臨激烈的競爭態(tài)勢。

       參考文獻(xiàn)：

       Hao Chen et al. Small-Molecule Inhibitors Directly Targeting KRAS as Anticancer Therapeutics. Journal of Medicinal Chemistry 2020 63 (23), 14404-14424